Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CEP55: sc-417522-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CEP55 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CEP55 (h) y el plásmido de doble nickasa CEP55 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CEP55. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CEP55 Anticuerpo (B-8): sc-374051
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CEP55 | sc-417522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CEP55 | sc-417522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEP55 (proteína centrosómica 55) codifica un regulador mitótico que se localiza en el centrosoma y en el cuerpo medio (midbody), donde ayuda a coordinar la abscisión durante las etapas terminales de la citocinesis. La proteína interactúa con la maquinaria ESCRT y con componentes asociados del cuerpo medio para garantizar la correcta resolución del surco de segmentación y la finalización de la división celular. La alteración de CEP55 perturba la dinámica del centrosoma, la organización del huso y la estabilidad cromosómica, lo que vincula su desregulación con fenotipos proliferativos y con la inestabilidad genómica observada en múltiples contextos de cáncer. Como resultado, CEP55 se utiliza con frecuencia para estudiar el control del ciclo celular, la salida de la mitosis y los mecanismos de aneuploidía en modelos celulares humanos.
CEP55 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CEP55 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CEP55. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CEP55. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CEP55 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.