Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CEACAM1 Double Nickase Plasmid (m): sc-424008-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CEACAM1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CEACAM1 Double-Nickase-Plasmid (m) und CEACAM1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ceacam1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CEACAM1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-424008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CEACAM1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-424008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ceacam1 kodiert CEACAM1, einen Adhäsionsrezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der bei der Maus auf Epithel- und Endothelzellen sowie auf mehreren Typen von Immunzellen exprimiert wird. CEACAM1 ist an homophilen und heterophilen Interaktionen beteiligt, die Zell-Zell-Kontakte, Gewebeorganisation und barriereassoziierte Signalwege regulieren, und kann in Leukozyten über ITIM-abhängige Signalwege inhibitorische Signale modulieren. Über Effekte auf Adhäsionsdynamik, Zytoskelett-Remodelling und Rezeptor-Crosstalk beeinflusst CEACAM1 Prozesse wie Angiogenese, Entzündungsreaktionen und die Homöostase des Epithels. Eine dysregulierte CEACAM1-Aktivität wurde in experimentellen Modellen mit veränderter Immunregulation und Tumorbiologie in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als Ziel in mechanistischen Studien zu Entzündung und krebsrelevanten Mikroumgebungen unterstützt.
CEACAM1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ceacam1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ceacam1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ceacam1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ceacam1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.