Plásmido Doble Nickase (h) Cdx1: sc-402522-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cdx1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cdx1 (h) y el plásmido de doble nickasa Cdx1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDX1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdx1 Anticuerpo (D-4): sc-515146
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cdx1 | sc-402522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cdx1 | sc-402522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDX1 codifica el factor de transcripción homeobox de tipo caudal Cdx1, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que contribuye al patrón anteroposterior y a la diferenciación del epitelio intestinal. Cdx1 integra señales del desarrollo, incluidos programas dependientes de Wnt/β-catenina y sensibles al ácido retinoico, para configurar redes transcripcionales específicas de linaje y la identidad regional. En tejidos adultos, CDX1 ayuda a mantener la homeostasis epitelial e influye en el equilibrio proliferación–diferenciación mediante el control transcripcional de genes diana aguas abajo. La desregulación de la expresión de CDX1 y la alteración de la actividad de la familia CDX se han asociado con metaplasia intestinal y con la biología tumoral colorrectal, lo que lo convierte en un locus útil para estudios mecanísticos de transformación y diferenciación epitelial.
Cdx1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDX1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.