CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h): sc-406842-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CDK2AP2 Double-Nickase-Plasmid (h) und CDK2AP2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CDK2AP2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-406842-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-406842-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK2AP2 (Cyclin-dependent kinase 2 associated protein 2) ist ein kleiner regulatorischer Faktor, der an der Kontrolle des Zellzyklusfortschritts beteiligt ist, indem er die CDK2-Aktivität und cyclinabhängige Checkpoint-Signalwege moduliert. Durch die Beeinflussung phosphorylierungsabhängiger Übergänge an der G1/S-Grenze trägt CDK2AP2 zur Proliferationskontrolle und zur Aufrechterhaltung der Genomstabilität bei. Veränderte CDK2-assoziierte regulatorische Netzwerke werden häufig im Kontext onkogener Fehlregulation des Zellzyklus und von Replikationsstress untersucht, wodurch CDK2AP2 einen relevanten Knotenpunkt für die mechanistische Analyse von Wachstums-Kontrollwegen darstellt. In humanen Zellen wird eine Störung von CDK2AP2 üblicherweise zusammen mit Readouts wie dem Eintritt in die S-Phase, DNA-Schadenssignalen und Veränderungen in Transkriptionsprogrammen, die mit Proliferation verknüpft sind, bewertet.
CDK2AP2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CDK2AP2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CDK2AP2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CDK2AP2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CDK2AP2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.