Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CDK11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405330
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CDK11 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CDK11, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdk11 Anticuerpo (8B6): sc-517026
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CDK11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405330 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CDK19 codifica una quinasa dependiente de ciclina que funciona dentro del módulo quinasa del complejo Mediator para modular la transcripción dependiente de la ARN polimerasa II y la fosforilación de sustratos asociados a la transcripción. Mediante la regulación de los programas de iniciación y elongación de la transcripción, CDK19 influye en la progresión del ciclo celular, la expresión génica en respuesta al estrés y las redes de transcripción dependientes de señales vinculadas a MAPK y otras vías. La actividad o la expresión desreguladas de CDK19 se han asociado con alteraciones del control proliferativo y con la reprogramación transcripcional observada en múltiples contextos de cáncer y otros trastornos proliferativos. CDK11 es una quinasa multifuncional de serina/treonina implicada en la regulación del ciclo celular, el empalme (splicing) del pre-ARNm y el control transcripcional, lo que respalda estudios sobre la comunicación cruzada entre redes de quinasas y la señalización compensatoria en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CDK11 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDK19 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDK19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDK19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CDK11.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDK19 para la investigación de la señalización de CDK11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CDK19 críticos para la función de CDK11
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDK19 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CDK11 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CDK11 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDK19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CDK11 (h) y el plásmido HDR CDK11 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDK19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDK19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.