Plasmide Double Nickase (h) CD83: sc-401864-NIC

CD83 code une glycoprotéine de la superfamille des immunoglobulines, transmembranaire de type I, rapidement induite lors de la maturation des cellules dendritiques et également exprimée par les lymphocytes B activés ainsi que par certains sous-ensembles de lymphocytes T. CD83 contribue à la présentation de l’antigène et à l’amorçage des lymphocytes T en modulant la formation de la synapse immunologique, les signaux de costimulation, ainsi que la stabilité et le trafic des récepteurs immunitaires de surface, en s’articulant avec des programmes d’activation liés à NF-κB et des voies de différenciation induites par les cytokines. À ce titre, CD83 est fréquemment étudiée dans les contextes de tolérance immunitaire, de signalisation inflammatoire et de régulation de l’immunité adaptative. Des modifications de l’expression et des profils de clivage/libération (shedding) de CD83 ont été associées à une dérégulation immunitaire dans l’auto-immunité, l’inflammation chronique et les interactions tumeur–système immunitaire, ce qui étaye son utilisation comme marqueur mécanistique en recherche en immunologie.

CD83 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD83 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD83. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD83. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD83.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.