CD7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407287

Descripción general

CD7 codifica un receptor transmembrana de la superfamilia de las inmunoglobulinas, expresado predominantemente en timocitos y en células T maduras, donde participa en la activación de las células T, la adhesión y la organización de la sinapsis inmunológica mediante interacciones que modulan los umbrales de señalización. La señalización asociada a CD7 se conecta con vías relacionadas con quinasas de la familia SRC y con vías vinculadas a MAPK, que influyen en la diferenciación de las células T, las respuestas de citocinas y la función efectora citotóxica. La expresión alterada de CD7 se utiliza con frecuencia como rasgo inmunofenotípico en biología linfoide y se estudia en el contexto de modelos de neoplasias de células T y de desregulación inmunitaria. Como marcador de superficie acoplado a funciones de señalización, CD7 ofrece un nodo manejable para analizar redes de señalización proximales al receptor de células T y programas de linaje.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CD7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CD7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CD7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CD7 para la investigación de la señalización de CD7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CD7 críticos para la función de CD7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CD7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CD7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CD7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD7 (h) y el plásmido HDR CD7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CD7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CD7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.