CD52 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403151
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD52 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD52, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD52 Anticuerpo (HI186): sc-51560
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD52 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403151 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CD52 es una glicoproteína de superficie anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que se expresa en altos niveles en los linfocitos maduros, donde contribuye a la organización de la membrana y a la señalización de las células inmunitarias dentro de las balsas lipídicas. Aunque posee un núcleo peptídico corto, CD52 presenta una glucosilación densa que puede influir en la agrupación de receptores, las interacciones célula–célula y la capacidad de respuesta a señales de activación en linajes hematopoyéticos. La expresión de CD52 está estrechamente vinculada a la diferenciación de los linfocitos y a la homeostasis inmunitaria, lo que la convierte en un marcador útil en estudios sobre estados de las células inmunes y biología de los leucocitos. Se han descrito alteraciones en la expresión de CD52 y asociaciones con el contexto inmunitario en distintas neoplasias hematológicas y en escenarios inflamatorios, lo que respalda su relevancia para la investigación mecanística de la regulación inmunitaria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD52 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CD52 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CD52 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CD52 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD52.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CD52 para la investigación de la señalización de CD52, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CD52 críticos para la función de CD52
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CD52 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD52 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD52 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CD52. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD52 (h) y el plásmido HDR CD52 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CD52 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CD52 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.