Plásmido Doble Nickase (m) CD39: sc-419549-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CD39 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD39 (m) y el plásmido de doble nickasa CD39 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Entpd1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CD39 | sc-419549-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CD39 | sc-419549-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Entpd1 del ratón codifica CD39 (ENTPD1), una ectonucleósido trifosfato difosfohidrolasa que hidroliza el ATP y el ADP extracelulares a AMP, modulando la señalización purinérgica y la producción posterior de adenosina en colaboración con CD73. Al controlar el equilibrio entre la señalización proinflamatoria de los receptores P2 impulsada por ATP y las vías inmunorreguladoras mediadas por adenosina, CD39 influye en la activación de leucitos, la homeostasis vascular, la función plaquetaria y las respuestas tisulares a la hipoxia y al daño. La actividad de CD39 es prominente en células endoteliales y en múltiples subpoblaciones inmunitarias, lo que la vincula a la regulación de la inflamación, la trombosis y el inmunometabolismo del microambiente tumoral. La expresión o función alterada de ENTPD1/CD39 se ha asociado con fenotipos inflamatorios y autoinmunes, respuestas a isquemia-reperfusión y supresión inmunitaria relacionada con el cáncer, lo que la convierte en una diana útil para estudios mecanísticos en modelos murinos.
CD39 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Entpd1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Entpd1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Entpd1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Entpd1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.