Plásmido CRISPR de Activación (m) CD37: sc-419547-ACT

El gen murino **Cd37** codifica **CD37**, una tetraspanina ampliamente expresada en las células B y en otros subgrupos de leucocitos que organiza microdominios de membrana y modula la señalización mediada por receptores. CD37 participa en la regulación de la amplitud de la señalización del receptor de células B, la formación de la sinapsis inmunológica y la adhesión y migración dependientes de integrinas, influyendo en vías downstream vinculadas a respuestas de citocinas y a la activación de linfocitos. A través de sus funciones de andamiaje, CD37 contribuye al control de la presentación de antígenos y de la comunicación celular dentro de los tejidos linfoides. La expresión o señalización desregulada de CD37 se ha asociado con alteraciones de la función inmunitaria humoral y de la homeostasis de los linfocitos, lo que convierte a **Cd37** en una diana útil para estudios mecanísticos en inmunología y en modelos de enfermedades hematológicas.

CD37 El plásmido de activación CRISPR (m) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de Cd37 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

CD37 El plásmido de activación CRISPR (m) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus Cd37 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional Cd37, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de CD37. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo Cd37 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de CD37 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía CD37 en células tumorales con expresión de Cd37 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.