Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD30L (m): sc-423454
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD30L Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD30L, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD30L Antibody (RM153): sc-19984
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD30L (m) | sc-423454 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tnfsf8 code CD30L (TNFSF8), un ligand membranaire de type II de la superfamille TNF qui se lie à CD30 (TNFRSF8) afin de moduler la communication entre cellules immunitaires. La signalisation CD30L–CD30 influence des programmes transcriptionnels dépendants de NF-κB et des MAPK, qui façonnent la costimulation des lymphocytes T, la production de cytokines et la différenciation induite par l’activation ; elle peut également affecter les décisions de survie cellulaire selon le contexte cellulaire. Dans des modèles murins, cet axe est souvent étudié pour son rôle dans l’organisation des tissus lymphoïdes, les réponses des centres germinatifs et la régulation de réseaux de signalisation inflammatoire pertinents pour la dérégulation immunitaire et des phénotypes lymphoprolifératifs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD30L (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tnfsf8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tnfsf8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tnfsf8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD30L.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tnfsf8 pour l'étude de la signalisation de CD30L, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tnfsf8 essentiels à la fonction de CD30L
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tnfsf8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD30L plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD30L plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tnfsf8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD30L plasmide HDR (m) et le CD30L (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tnfsf8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tnfsf8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.