Plásmido Doble Nickase (h) CD30: sc-402068-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD30 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD30 (h) y el plásmido de doble nickasa CD30 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TNFRSF8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD30 Anticuerpo (C-3): sc-46683
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD30 | sc-402068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD30 | sc-402068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF8 codifica CD30, un miembro de la superfamilia de receptores del TNF expresado en linfocitos T y B activados que actúa como un receptor coestimulador inducible. La unión/activación de CD30 promueve el reclutamiento de adaptadores TRAF y la activación aguas abajo de las vías de señalización NF-κB, MAPK/ERK y JNK, modulando la producción de citocinas, la proliferación y la muerte celular inducida por activación según el contexto celular. La desregulación de la señalización y la expresión de CD30 se asocia estrechamente con estados de activación linfoide y se estudia ampliamente en el linfoma de Hodgkin y el linfoma anaplásico de células grandes como marcador de programas de señalización inmunitaria alterados. Como receptor de superficie celular que integra señales inflamatorias, CD30 también es relevante para investigaciones sobre las interacciones del microambiente inmunitario y la reprogramación transcripcional en linfocitos malignos y activados.
CD30 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TNFRSF8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TNFRSF8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TNFRSF8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TNFRSF8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.