CD30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423446
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD30 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD30, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD30 Anticuerpo (C-3): sc-46683
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423446 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Mouse Tnfrsf8 codifica CD30, un miembro de la superfamilia de receptores de TNF expresado en linfocitos activados, que transduce señales a través de proteínas adaptadoras como las TRAF para modular la actividad de las vías de NF-κB y MAPK. La señalización dependiente de CD30 influye en los programas de activación de células T y B, la producción de citocinas y las decisiones de supervivencia que configuran la homeostasis inmunitaria. En modelos murinos, la alteración de la función de CD30 se ha utilizado para investigar mecanismos de diferenciación de linfocitos, regulación inmunitaria e inflamación dentro de los tejidos linfoides. Las vías asociadas a CD30 desreguladas son relevantes para estudios de activación inmunitaria aberrante y fenotipos linfoproliferativos, lo que respalda su utilidad como un nodo genético para la investigación en inmunología.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD30 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnfrsf8 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnfrsf8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnfrsf8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD30.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnfrsf8 para la investigación de la señalización de CD30, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tnfrsf8 críticos para la función de CD30
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnfrsf8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD30 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD30 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnfrsf8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD30 (m) y el plásmido HDR CD30 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnfrsf8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnfrsf8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.