Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CD28: sc-401525-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD28 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD28 (h) y el plásmido de doble nickasa CD28 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CD28. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD28 Anticuerpo (CD28.2): sc-19655
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD28 | sc-401525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD28 | sc-401525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD28 codifica un receptor coestimulador expresado en las células T que coopera con la señalización del receptor de células T para promover la activación, la proliferación, la producción de citocinas y la supervivencia. La interacción de CD28 con CD80/CD86 en las células presentadoras de antígeno amplifica la señalización PI3K–AKT–mTOR, favorece la activación de las vías NF-κB y MAPK y aumenta la transcripción de IL-2, moldeando la diferenciación efectora y la formación de memoria. La actividad de CD28 ayuda a equilibrar la tolerancia inmunitaria y la capacidad de respuesta, y las alteraciones en su señalización se han vinculado a una activación desregulada de las células T y a patología inmunomediada. Dado que CD28 es central para el control de los puntos de control coestimuladores, se estudia ampliamente en contextos como la autoinmunidad, la inflamación crónica, la infección y la inmunología tumoral.
CD28 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CD28 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CD28. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CD28. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CD28 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.