Particules Lentivirales d'Activation (m) CD2: sc-419537-LAC

Le gène murin **Cd2** code CD2, un récepteur de surface d’adhésion et de costimulation exprimé principalement par les lymphocytes T et les cellules NK, qui renforce la formation de la synapse immunologique via des interactions avec CD58/CD48 et coordonne la signalisation avec le complexe du récepteur des lymphocytes T (TCR). L’engagement de CD2 contribue à l’activation de cascades proximales de tyrosine kinases impliquant LCK, FYN et ZAP70, façonnant des programmes transcriptionnels en aval dépendants des voies MAPK et NF-κB, qui régissent l’activation, la production de cytokines et la fonction effectrice cytotoxique. Des altérations de l’expression ou de la signalisation de CD2 ont été associées à une activation et une tolérance lymphocytaires dysrégulées, faisant de **Cd2** un nœud utile pour étudier les mécanismes inflammatoires et auto-immuns ainsi que l’échappement immunitaire dans les microenvironnements tumoraux. Dans les modèles murins, la biologie de CD2 est fréquemment exploitée pour analyser le développement des lymphocytes T, leur trafic et leur expansion induite par l’antigène.

Les particules d'activation lentivirales CD2 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Cd2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD2 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Cd2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD2. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Cd2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.