Particules Lentivirales d'Activation (m) CD163: sc-429989-LAC

Le gène murin **Cd163** code **CD163**, un récepteur scavenger exprimé principalement par les monocytes et les macrophages tissulaires, qui se lie aux complexes hémoglobine–haptoglobine et favorise leur élimination par endocytose. L’activité de CD163 s’inscrit à l’interface des programmes de polarisation des macrophages et des réseaux de signalisation inflammatoire, notamment des voies dépendantes des cytokines qui modulent la prise en charge des antigènes, les réponses au stress oxydant et la résolution de l’inflammation. En régulant la gestion de l’hème/du fer et la capture de ligands immunomodulateurs, CD163 contribue à l’homéostasie tissulaire dans des contextes d’hémolyse, de lésion stérile et d’exposition aux pathogènes. Des modifications de l’expression de CD163 et de la distribution des macrophages sont fréquemment utilisées comme indicateurs du remodelage myéloïde dans des modèles d’inflammation chronique, de dérégulation métabolique, de fibrose et de biologie des macrophages associés aux tumeurs.

Les particules d'activation lentivirales CD163 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Cd163 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD163 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Cd163, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD163. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Cd163 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.