Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD137L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423455
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD137L El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD137L, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD137L Anticuerpo (G-10): sc-398933
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD137L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423455 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tnfsf9 codifica CD137L (4-1BBL), un ligando de la superfamilia TNF expresado principalmente en células presentadoras de antígeno que se une a CD137 (TNFRSF9) para proporcionar potentes señales coestimuladoras a las células T y otros efectores inmunitarios. La señalización CD137L–CD137 promueve la activación de las vías NF-κB y MAPK, favoreciendo la expansión y supervivencia de las células T, la producción de citocinas y la conformación de respuestas de memoria, con efectos adicionales sobre la maduración de las células dendríticas y la función de las células mieloides. En modelos murinos, la actividad de Tnfsf9 se ha implicado en la regulación de circuitos inflamatorios y la homeostasis inmunitaria, influyendo en contextos como la autoinmunidad, la inflamación crónica y la vigilancia inmunitaria antitumoral. Estas funciones hacen de CD137L un nodo útil para diseccionar fenotipos inmunitarios dependientes de la coestimulación y respuestas impulsadas por antígenos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD137L (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnfsf9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnfsf9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnfsf9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD137L.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnfsf9 para la investigación de la señalización de CD137L, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tnfsf9 críticos para la función de CD137L
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnfsf9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD137L CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD137L CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnfsf9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD137L (m) y el plásmido HDR CD137L (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnfsf9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnfsf9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.