CD137 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405068
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD137 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD137, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD137 Anticuerpo (BBK-2): sc-58947
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD137 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405068 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TNFRSF9 codifica CD137 (4-1BB), un receptor coestimulador inducible de la superfamilia de receptores del TNF que se expresa en células T activadas y en otros subgrupos inmunitarios. Tras su activación, CD137 recluta adaptadores TRAF para estimular las vías de señalización de NF-κB y MAPK, lo que promueve la supervivencia y proliferación celulares, la producción de citocinas y la reprogramación metabólica durante las respuestas inmunitarias. Esta vía contribuye a la regulación de la actividad de los linfocitos citotóxicos, la función de las células dendríticas y la señalización inflamatoria dentro del microambiente tisular. La desregulación de la señalización de TNFRSF9/CD137 se ha asociado con estados alterados de activación inmunitaria observados en contextos de inmunología del cáncer, infección crónica e investigación de enfermedades autoinmunes o inflamatorias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD137 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TNFRSF9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TNFRSF9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TNFRSF9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD137.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TNFRSF9 para la investigación de la señalización de CD137, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TNFRSF9 críticos para la función de CD137
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TNFRSF9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD137 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD137 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TNFRSF9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD137 (h) y el plásmido HDR CD137 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TNFRSF9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TNFRSF9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.