CCL14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406423

Descripción general

CCL14 codifica una quimiocina CC secretada que ayuda a coordinar el tráfico de leucocitos al interactuar con receptores de quimiocinas en monocitos, linfocitos y otros subtipos de células inmunitarias, moldeando así los gradientes inflamatorios y el posicionamiento de las células inmunes dentro de los tejidos. Como parte de la red más amplia de quimiocinas, CCL14 contribuye a la quimiotaxis, a la modulación de la señalización de citocinas y al diálogo cruzado con vías que regulan la activación endotelial y la remodelación de la matriz extracelular. La señalización de quimiocinas desregulada en la que participa CCL14 se ha vinculado con patrones alterados de infiltración inmunitaria observados en estados inflamatorios crónicos y en la inflamación asociada a tumores, donde los cambios en las señales quimiocínicas pueden influir en la vigilancia inmunitaria y en las interacciones con el estroma. En consecuencia, CCL14 se estudia con frecuencia en contextos como ensayos de migración de células inmunes, perfiles de señalización inflamatoria y el mapeo a nivel de sistemas de redes de quimiocinas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CCL14 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CCL14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CCL14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CCL14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CCL14.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CCL14 para la investigación de la señalización de CCL14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CCL14 críticos para la función de CCL14
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CCL14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CCL14 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CCL14 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CCL14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CCL14 (h) y el plásmido HDR CCL14 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CCL14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CCL14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.