casein kinase IIα′ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401148

Descripción general

CSNK2A2 codifica la subunidad catalítica alfa′ de la caseína quinasa II humana, una quinasa de serina/treonina constitutivamente activa que forma la holoenzima CK2 junto con subunidades reguladoras beta y fosforila un amplio espectro de sustratos nucleares y citoplasmáticos. La señalización de CK2 se integra con procesos centrales como la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN, la regulación de la cromatina y la apoptosis, y modula vías principales como NF-κB, Wnt/β-catenina, PI3K/AKT y MAPK mediante la fosforilación de sustratos. Al moldear el control dependiente de la fosforilación de factores de transcripción y proteínas de procesamiento de ARN, CSNK2A2 influye en la proliferación y la adaptación al estrés. La actividad desregulada de CK2 y la expresión alterada de CSNK2A2 se han asociado con la biología tumoral, la señalización inflamatoria y otras patologías impulsadas por la fosforilación, lo que respalda su utilidad como un nodo mecanístico en la investigación biomédica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO casein kinase IIα′ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CSNK2A2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CSNK2A2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CSNK2A2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína casein kinase IIα′.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CSNK2A2 para la investigación de la señalización de casein kinase IIα′, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CSNK2A2 críticos para la función de casein kinase IIα′
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CSNK2A2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CSNK2A2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR casein kinase IIα′ (h) y el plásmido HDR casein kinase IIα′ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CSNK2A2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CSNK2A2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.