Partículas Lentivirales de Activación (h) casein kinase IIα: sc-418515-LAC

CSNK2A1 codifica la subunidad alfa catalítica de la caseína quinasa II (CK2α), una quinasa de serina/treonina constitutivamente activa que fosforila un amplio conjunto de sustratos implicados en la transducción de señales, la transcripción y el control del ciclo celular. CK2α participa en vías como NF-κB, Wnt/β-catenina y PI3K/AKT, ayudando a coordinar las respuestas a señales de crecimiento y al estrés celular. Mediante la regulación de proteínas asociadas a la cromatina, factores de respuesta al daño del ADN y moduladores de la apoptosis, CSNK2A1 influye en la supervivencia celular y la proteostasis. La desregulación de la actividad de CK2 se ha vinculado con una proliferación alterada y una señalización aberrante en múltiples contextos de enfermedad, lo que convierte a CSNK2A1 en un nodo ampliamente estudiado en redes de fosfoseñalización.

Las partículas de activación lentiviral casein kinase IIα (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CSNK2A1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral casein kinase IIα (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CSNK2A1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de casein kinase IIα. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CSNK2A1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.