casein kinase Iγ3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406678

Descripción general

CSNK1G3 codifica la caseína quinasa I gamma 3 (CK1γ3), una quinasa de proteínas serina/treonina asociada a la membrana de la familia CK1 que fosforila diversos sustratos para modular la transducción de señales, el recambio de proteínas y el tráfico subcelular. Las isoformas de CK1 suelen interactuar con vías como la señalización Wnt/β-catenina, el control circadiano y del ciclo celular, y eventos de fosforilación proximales a receptores que influyen en la endocitosis y la organización del citoesqueleto. A través de estas funciones, la actividad de CSNK1G3 puede afectar puntos de control dependientes de la fosforilación, la degradación mediada por ubiquitina y la dinámica de la señalización en respuesta a estímulos. La señalización quinasa desregulada y las redes de fosforilación alteradas se asocian con frecuencia a fenotipos proliferativos y neurobiológicos, lo que respalda investigar CSNK1G3 en modelos celulares relevantes para enfermedad sin implicar resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO casein kinase Iγ3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CSNK1G3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CSNK1G3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CSNK1G3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína casein kinase Iγ3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CSNK1G3 para la investigación de la señalización de casein kinase Iγ3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CSNK1G3 críticos para la función de casein kinase Iγ3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CSNK1G3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CSNK1G3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR casein kinase Iγ3 (h) y el plásmido HDR casein kinase Iγ3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CSNK1G3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CSNK1G3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.