Plásmido Doble Nickase (h) CARM1: sc-404087-NIC

CARM1 (PRMT4) es una metiltransferasa de arginina en proteínas que cataliza la dimetilación asimétrica de la histona H3 y de sustratos no histónicos, coordinando el control epigenético de la transcripción. Mediante la metilación de coactivadores transcripcionales y factores asociados a la cromatina, CARM1 integra señales de distintas vías en programas que regulan la progresión del ciclo celular, la especificación de linaje y el procesamiento de ARN. Participa en rutas de regulación transcripcional vinculadas a la señalización de receptores nucleares, la coactivación del receptor de estrógeno y complejos de remodelación de la cromatina que determinan la actividad de potenciadores y promotores. La desregulación de la expresión o actividad de CARM1 se ha asociado con estados transcripcionales oncogénicos y programas de diferenciación alterados, lo que la convierte en una diana clave para estudios mecanísticos en biología del cáncer y en sistemas de desarrollo.

CARM1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CARM1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CARM1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CARM1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CARM1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.