Carbonyl reductase 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406552

Descripción general

CBR3 codifica la carbonil reductasa 3, una oxidorreductasa citosólica dependiente de NADPH que cataliza la reducción de compuestos carbonílicos reactivos, incluidos aldehídos y cetonas generados durante el metabolismo de xenobióticos y el estrés oxidativo. Al modular el equilibrio redox celular y la detoxificación de carbonilos, CBR3 contribuye a procesos metabólicos de fase I/II y ayuda a limitar la acumulación de intermediarios electrófilos que pueden dañar proteínas, lípidos y ADN. La variación en la actividad de CBR3 se ha estudiado en el contexto del procesamiento diferencial de productos endógenos de la peroxidación lipídica y de diversos sustratos de moléculas pequeñas, lo que vincula a esta enzima con vías relevantes para las respuestas al estrés y la adaptación metabólica. La actividad alterada de las carbonil reductasas se investiga con frecuencia en biología del cáncer, farmacología y modelos de toxicología, donde el estado redox y el procesamiento de metabolitos influyen en la supervivencia celular y el fenotipo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Carbonyl reductase 3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CBR3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CBR3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CBR3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Carbonyl reductase 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CBR3 para la investigación de la señalización de Carbonyl reductase 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CBR3 críticos para la función de Carbonyl reductase 3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CBR3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Carbonyl reductase 3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Carbonyl reductase 3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CBR3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Carbonyl reductase 3 (h) y el plásmido HDR Carbonyl reductase 3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CBR3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CBR3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.