Plasmide Double Nickase (m) Calpain 6: sc-419444-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Calpain 6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Calpain 6 Double Nickase (m) et le plasmide Calpain 6 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Capn6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Calpain 6 | sc-419444-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Capn6** code la calpaïne 6 (CAPN6), un membre atypique de la famille des calpaïnes, dépourvu d’une activité catalytique clé mais conservant un rôle d’échafaudage régulateur au sein du cytosquelette. CAPN6 influence la stabilité des microtubules, le remodelage de l’actine et la motilité cellulaire, et se trouve ainsi reliée à des voies qui contrôlent la dynamique du cytosquelette, le trafic vésiculaire et les programmes de différenciation cellulaire. Dans les tissus en développement et dans des contextes myogéniques, CAPN6 a été associée à la régulation des états de prolifération et de différenciation, ce qui la rend pertinente pour l’étude de la morphogenèse et de la réparation tissulaires. Des modifications de l’expression de CAPN6 ont été rapportées dans des phénotypes de remodelage associés à des maladies, ce qui soutient son exploration dans des modèles de fibrose, d’invasion des cellules cancéreuses et d’anomalies neuromusculaires ou du développement, sans présumer de retombées cliniques.
Calpain 6 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Capn6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Capn6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Capn6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Capn6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.