Plásmido Doble Nickase (h) cadherin-8: sc-401576-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cadherin-8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cadherin-8 (h) y el plásmido de doble nickasa cadherin-8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDH8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cadherin-8 | sc-401576-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cadherin-8 | sc-401576-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH8 codifica la cadherina-8, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio de la familia de las cadherinas clásicas, que favorece el reconocimiento neuronal selectivo y la formación de uniones intercelulares estables. Mediante unión homofílica y su acoplamiento a las cateninas, la cadherina-8 contribuye a la organización de las uniones adherentes, a la remodelación del citoesqueleto de actina y a la señalización dependiente del contacto, lo que influye en el crecimiento de neuritas y en la conectividad sináptica. La actividad de CDH8 se interrelaciona con vías que regulan la morfogénesis tisular y el ensamblaje de circuitos neuronales, donde se requieren dinámicas de adhesión precisas para un desarrollo normal. La alteración de la expresión de CDH8 o sus variantes se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo, lo que lo convierte en una diana útil para estudiar los mecanismos que vinculan la adhesión con la formación de redes neuronales y la biología de enfermedades relacionadas.
cadherin-8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDH8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDH8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDH8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDH8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.