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cadherin-26CRISPR激活质粒(m) | sc-436285-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
cadherin-26CRISPR激活质粒(m2) | sc-436285-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
小鼠 Cdh26 编码钙黏蛋白-26(cadherin-26),属于钙黏蛋白超家族中的一种钙依赖性细胞—细胞黏附分子,有助于上皮组织的结构组织与屏障完整性的维持。通过与黏着连接(adherens junction)相关的相互作用,钙黏蛋白-26 支持细胞极性、接触依赖性信号传导,并协同调控影响上皮分化与重塑的细胞骨架动态。钙黏蛋白表达模式的改变常与黏附、迁移及炎症性组织反应的变化相关,因此 Cdh26 是研究上皮稳态与情境依赖性重塑程序的有用靶点。在小鼠体系中,调控 Cdh26 可用于探究黏附网络如何与屏障组织中的发育及免疫相关信号通路发生交叉作用。
cadherin-26 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Cdh26的表达。
cadherin-26 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Cdh26基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Cdh26转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性cadherin-26表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Cdh26位点,并能够研究内源性位点上依赖于cadherin-26的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Cdh26表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟cadherin-26通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。