Plásmido Doble Nickase (h) C7: sc-404773-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C7 (h) y el plásmido de doble nickasa C7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C7 | sc-404773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C7 | sc-404773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El componente del complemento C7 codifica una proteína de la vía terminal del sistema del complemento que participa en el ensamblaje del complejo de ataque a la membrana (MAC) al unirse al complejo C5b-6 y favorecer la inserción de C8 y la polimerización de C9 en las membranas diana. Esta actividad respalda la defensa inmunitaria innata y los mecanismos inflamatorios de eliminación a través de las vías del complemento clásica, de las lectinas y alternativa, que convergen en la activación de C5. La activación desregulada del complemento y la formación alterada del MAC se han implicado en lesiones tisulares mediadas por el sistema inmunitario y en la susceptibilidad a determinadas infecciones, lo que convierte a C7 en un punto de interés útil para estudiar la función efectora del complemento. C7 también proporciona una lectura accesible para investigar la señalización inmunitaria extracelular, las respuestas opsonofagocíticas y la interacción cruzada con la inflamación impulsada por citocinas.
C7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.