C6orf130 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415131

Descripción general

OARD1 (C6orf130) es un gen humano que codifica una proteína con una anotación funcional limitada, pero la evidencia disponible sugiere que participa en la regulación de la homeostasis celular mediante interacciones proteicas que influyen en la expresión génica y en procesos sensibles al estrés. Los patrones de expresión y las asociaciones genéticas han implicado este locus en vías relevantes para la función neuronal y la regulación metabólica, donde una actividad alterada podría contribuir a fenotipos de enfermedades complejas. Como factor aún no completamente caracterizado, C6orf130 se investiga con frecuencia para definir su localización subcelular, sus socios de interacción y las consecuencias transcripcionales o de señalización aguas abajo. Los estudios de pérdida de función ayudan a aclarar si OARD1 afecta al crecimiento celular, la diferenciación o las respuestas adaptativas al estrés proteotóxico u oxidativo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C6orf130 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OARD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OARD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OARD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C6orf130.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OARD1 para la investigación de la señalización de C6orf130, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OARD1 críticos para la función de C6orf130
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OARD1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C6orf130 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C6orf130 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OARD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C6orf130 (h) y el plásmido HDR C6orf130 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OARD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OARD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.