C530008M17Rik Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435830

Descripción general

C530008M17Rik codifica una proteína de ratón que aún no está completamente caracterizada, y los recursos genómicos actuales ofrecen una anotación funcional limitada. Como producto génico predicho, suele investigarse en el contexto de conjuntos de datos transcriptómicos y proteómicos para definir patrones de expresión específicos de tipos celulares y posibles funciones subcelulares. La evidencia emergente procedente de análisis de coexpresión y de cribados de perturbación genética puede ayudar a situar a C530008M17Rik dentro de procesos celulares más amplios, como la diferenciación, las respuestas al estrés o la homeostasis específica de tejidos, según el sistema experimental. Dada la escasez de datos mecanísticos, se utilizan con frecuencia enfoques de knockout dirigidos para aclarar su participación en rutas celulares y posibles vínculos con fenotipos relevantes para la biología del desarrollo y el modelado de enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C530008M17Rik (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C530008M17Rik en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C530008M17Rik junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C530008M17Rik tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C530008M17Rik.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C530008M17Rik para la investigación de la señalización de C530008M17Rik, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de C530008M17Rik críticos para la función de C530008M17Rik
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C530008M17Rik para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C530008M17Rik CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido C530008M17Rik CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C530008M17Rik. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C530008M17Rik (m) y el plásmido HDR C530008M17Rik (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C530008M17Rik para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C530008M17Rik definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.