C1QBP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-419387-LAC

C1qbp codifica a proteína de ligação ao subcomponente q do componente 1 do complemento (C1QBP), uma proteína mitocondrial multifuncional que também se localiza em outros compartimentos celulares e participa da biogênese de ribossomos, do processamento de RNA mitocondrial e da homeostase da fosforilação oxidativa. A C1QBP sustenta a bioenergética celular e a adaptação ao estresse, conectando a tradução mitocondrial e a função da cadeia respiratória a programas mais amplos de sinalização metabólica e da imunidade inata. A desregulação de C1QBP tem sido associada a alterações na função mitocondrial, respostas inflamatórias e fenótipos de sobrevivência celular relevantes para a neurodegeneração, a disfunção cardiometabólica e a biologia do câncer em modelos experimentais. Em sistemas murinos, a C1QBP é frequentemente estudada no contexto da integridade mitocondrial, do controle de ROS (espécies reativas de oxigênio) e de vias relacionadas à apoptose.

As Partículas de Ativação Lentivirais C1QBP (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de C1qbp numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais C1QBP (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição C1qbp, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de C1QBP. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo C1qbp e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.