Plásmido Doble Nickase (h) C1q-C: sc-403618-NIC

C1QC codifica la cadena C del componente del complemento C1q, una molécula de reconocimiento de patrones que inicia la vía clásica del complemento al unirse a complejos inmunes y a estructuras propias alteradas. C1q participa en la opsonización, la eliminación fagocítica y la modulación inmunitaria, conectando el reconocimiento inmunitario innato con la activación posterior del complemento y la señalización inflamatoria. En el sistema nervioso central y en tejidos periféricos, C1q contribuye a la poda sináptica mediada por microglía, a la eliminación de detritos y a la regulación del entorno de citocinas, vinculando la biología del complemento con la comunicación neuroinmunitaria. La expresión desregulada de C1q/C1QC y la activación del complemento se asocian con procesos inflamatorios y autoinmunes, neurodegeneración y fenotipos de macrófagos asociados a tumores, lo que respalda estudios mecanísticos del remodelado tisular impulsado por el complemento.

C1q-C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C1QC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C1QC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C1QC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C1QC alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.