Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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C1INH Plasmide Double Nickase (h): sc-403065-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C1INH Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C1INH Double Nickase Plasmid (h) e il C1INH Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SERPING1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: C1INH Antibody (B-11): sc-377062
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C1INH Plasmide Double Nickase (h) | sc-403065-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C1INH Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403065-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SERPING1 codifica l’inibitore della C1 esterasi (C1INH), una serpin secreta che inibisce in modo irreversibile molte proteasi seriniche del sistema del complemento e delle vie di attivazione da contatto, tra cui C1r/C1s, MASP-1/2, la callicreina plasmatica e il fattore XIIa. Limitando l’attivazione del complemento classico e della via lectinica e riducendo la generazione di bradichinina, C1INH contribuisce a mantenere l’omeostasi vascolare e previene un’amplificazione infiammatoria inappropriata. Un’alterazione della funzione di SERPING1 perturba la segnalazione del complemento e delle chinine, con forte rilevanza per disturbi caratterizzati da attività deregolata delle proteasi plasmatiche, aumento della permeabilità vascolare e fenotipi di edema infiammatorio.
C1INH Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SERPING1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SERPING1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SERPING1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SERPING1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.