Plásmido Doble Nickase (h) C19orf57: sc-413149-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C19orf57 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C19orf57 (h) y el plásmido de doble nickasa C19orf57 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C19orf57. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C19orf57 | sc-413149-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C19orf57 | sc-413149-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C19orf57 codifica una pequeña proteína humana con una anotación funcional limitada; en varios conjuntos de datos se ha descrito que se localiza en el núcleo y se asocia con procesos vinculados al metabolismo del ARN y al mantenimiento del genoma acoplado al ciclo celular. Estudios de transcriptómica y proteómica sugieren una regulación dependiente del contexto a lo largo de distintos estados proliferativos, lo que respalda investigar posibles funciones en el control transcripcional, el procesamiento de ARN y las respuestas al estrés asociado a la replicación. Se han observado patrones de expresión alterados de C19orf57 en múltiples conjuntos de datos relevantes para enfermedad, incluidos perfiles asociados a cáncer, lo que lo convierte en un locus útil para estudios mecanísticos de regulación génica y aptitud celular. Dado que su ubicación en vías biológicas aún no está completamente definida, C19orf57 se considera un gen candidato para cribados imparciales de pérdida de función y para el mapeo de redes en células humanas.
C19orf57 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C19orf57 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C19orf57. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C19orf57. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C19orf57 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.