Plásmido Doble Nickase (h) C19orf46: sc-407273-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C19orf46 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C19orf46 (h) y el plásmido de doble nickasa C19orf46 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SYNE4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C19orf46 | sc-407273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C19orf46 | sc-407273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYNE4 (también reportado en algunas anotaciones como C19orf46) codifica Nesprin-4, una proteína de la membrana nuclear externa con dominio KASH que acopla el núcleo al citoesqueleto a través de complejos LINC con proteínas SUN. Este enlace ayuda a coordinar el posicionamiento nuclear, la mecanotransducción y la organización del citoesqueleto, procesos relevantes para la migración celular, la polaridad y la arquitectura tisular. SYNE4 se estudia especialmente en epitelios sensoriales, donde el acoplamiento núcleo–citoesqueleto sostiene la integridad celular, y la alteración de la mecánica mediada por LINC se ha asociado con disfunción neurosensorial. En biología del cáncer y en investigación sobre estabilidad genómica, la mecánica nuclear alterada y las redes de proteínas de la envoltura nuclear se examinan con frecuencia como posibles contribuyentes a fenotipos invasivos y respuestas al estrés.
C19orf46 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SYNE4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SYNE4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SYNE4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SYNE4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.