C19orf12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406640

Descripción general

C19orf12 codifica una proteína pequeña asociada a las mitocondrias, implicada en el manejo de lípidos y en el mantenimiento de la homeostasis mitocondrial, con vínculos con las respuestas celulares al estrés oxidativo y el metabolismo del hierro. Los estudios funcionales relacionan C19orf12 con la biología de la membrana mitocondrial y con procesos que influyen en la producción de energía, el equilibrio redox y las vías de control de calidad de los orgánulos, como la mitofagia. La alteración de C19orf12 se asocia con la neurodegeneración con acumulación de hierro en el cerebro (NBIA), lo que subraya su relevancia para los mecanismos de vulnerabilidad neuronal, la desregulación del hierro y la disfunción mitocondrial. Por ello, C19orf12 se estudia con frecuencia en modelos que analizan la señalización de estrés mitocondrial, la remodelación lipídica y las vías de enfermedad neurodegenerativa.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C19orf12 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C19orf12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C19orf12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C19orf12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C19orf12.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C19orf12 para la investigación de la señalización de C19orf12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de C19orf12 críticos para la función de C19orf12
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C19orf12 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C19orf12 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C19orf12 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C19orf12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C19orf12 (h) y el plásmido HDR C19orf12 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C19orf12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C19orf12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.