Plásmido Doble Nickase (h) C15orf27: sc-414201-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C15orf27 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C15orf27 (h) y el plásmido de doble nickasa C15orf27 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TMEM266. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C15orf27 | sc-414201-NIC | 20 µg | $410.00 |
TMEM266 (también anotado como C15orf27) codifica una proteína transmembrana multipaso predicha, con una caracterización funcional limitada en células humanas. Los patrones de expresión y las características de secuencia sugieren un papel en procesos asociados a membranas, como el tráfico de proteínas, la comunicación entre orgánulos o la regulación de la señalización ligada a receptores, con posibles impactos en la homeostasis celular. Al tratarse de un gen con anotación incompleta, TMEM266 se prioriza con frecuencia en estudios transcriptómicos y de genómica funcional para aclarar la conectividad de vías y fenotipos celulares dependientes del contexto. La desregulación de la expresión de proteínas transmembrana no caracterizadas puede servir como una lectura molecular de estados de señalización alterados en modelos relevantes para enfermedades, lo que respalda la investigación mecanística más que la interpretación clínica.
C15orf27 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TMEM266 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TMEM266. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TMEM266. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TMEM266 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.