C12orf34 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408987

Descripción general

FAM222A codifica la proteína humana C12orf34, un factor escasamente caracterizado con vínculos emergentes con la homeostasis celular y la señalización sensible al estrés. Los conjuntos de datos transcriptómicos y proteómicos disponibles sugieren una expresión dependiente del contexto y una posible participación en el tráfico intracelular y en redes de proteostasis que se interconectan con vías relacionadas con la inflamación. Se ha informado de una expresión alterada de FAM222A/C12orf34 en perfiles moleculares asociados a enfermedades, incluidos conjuntos de datos de neurodegeneración y cáncer, lo que respalda que se continúe investigando sus funciones reguladoras. Los modelos de pérdida de función son útiles para aclarar cómo C12orf34 contribuye al diálogo cruzado entre vías que afecta la supervivencia celular, el equilibrio de la señalización y fenotipos específicos de tejido.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C12orf34 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM222A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM222A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM222A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C12orf34.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM222A para la investigación de la señalización de C12orf34, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM222A críticos para la función de C12orf34
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM222A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C12orf34 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C12orf34 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM222A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C12orf34 (h) y el plásmido HDR C12orf34 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM222A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM222A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.