c-Rel Plasmide Double Nickase (h): sc-400478-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- c-Rel Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il c-Rel Double Nickase Plasmid (h) e il c-Rel Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira REL. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: c-Rel Antibody (B-6): sc-6955
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
c-Rel Plasmide Double Nickase (h) | sc-400478-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Rel Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400478-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
REL codifica c-Rel, un fattore di trascrizione della famiglia NF-κB che regola programmi di espressione genica inducibili, controllando l’attivazione dei linfociti, la produzione di citochine, la sopravvivenza cellulare e la differenziazione. c-Rel partecipa alla segnalazione canonica di NF-κB a valle di recettori quali TCR/BCR, CD40 e i recettori Toll-like, coordinando reti trascrizionali infiammatorie e immunitarie. Un’attività deregolata di REL e un’alterata regolazione della via di NF-κB sono state implicate nella disfunzione immunitaria e in stati trascrizionali oncogenici, in particolare nelle neoplasie ematologiche. In quanto regolatore legante il DNA, c-Rel è spesso studiato per il suo ruolo nell’interazione con la cromatina dipendente dallo stimolo e nell’output trascrizionale specifico del contesto.
c-Rel Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus REL nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di REL. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di REL. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con REL interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.