c-Maf Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421531

Descripción general

Maf codifica c-Maf, un factor de transcripción de tipo cremalleras de leucina básicas (bZIP) que regula programas de expresión génica específicos de linaje en tejidos inmunitarios y endocrinos. En el ratón, c-Maf es un determinante clave de la diferenciación de las células T y de la expresión de citocinas; contribuye a redes transcripcionales que configuran la polarización de las células T colaboradoras y las respuestas de los macrófagos, y también participa en la regulación génica del cristalino y de los islotes pancreáticos. c-Maf integra señales de vías activadas por MAPK y por citocinas para modular la accesibilidad de la cromatina y la actividad de promotores y potenciadores (enhancers) en loci diana. La actividad desregulada de MAF se ha vinculado con inflamación mediada por el sistema inmunitario y con estados transcripcionales oncogénicos en neoplasias hematológicas, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios de vías y modelos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO c-Maf (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Maf en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Maf junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Maf tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína c-Maf.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Maf para la investigación de la señalización de c-Maf, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Maf críticos para la función de c-Maf
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Maf para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido c-Maf CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido c-Maf CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Maf. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR c-Maf (m) y el plásmido HDR c-Maf (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Maf para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Maf definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.