c-Jun Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400077-KO-2

Descripción general

JUN codifica c-Jun, un componente central del complejo del factor de transcripción AP-1, que integra señales extracelulares en programas de expresión génica dependientes del contexto. c-Jun se induce rápidamente por señales de estrés y mitogénicas y se regula mediante fosforilación aguas abajo de las cascadas MAPK/JNK, modulando respuestas transcripcionales que controlan la proliferación, la diferenciación, la apoptosis y la señalización inflamatoria. A través de la regulación dependiente de AP-1 de citocinas, enzimas de remodelado de la matriz y reguladores del ciclo celular, c-Jun conecta la transducción de señales con cambios en la accesibilidad de la cromatina y en la salida transcripcional. La actividad desregulada de JUN/AP-1 se ha implicado en la transformación oncogénica, la invasión tumoral y procesos inmunitarios y neuroinflamatorios, lo que lo convierte en un nodo clave para estudios mecanísticos en modelos de enfermedad humana.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO c-Jun (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen JUN en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del JUN junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de JUN tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína c-Jun.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en JUN para la investigación de la señalización de c-Jun, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de JUN críticos para la función de c-Jun
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de JUN para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido c-Jun CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido c-Jun CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus JUN. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR c-Jun (h) y el plásmido HDR c-Jun (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología JUN para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana JUN definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.