Plásmido Doble Nickase (h) c-IAP2: sc-400762-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)c-IAP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa c-IAP2 (h) y el plásmido de doble nickasa c-IAP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BIRC3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: c-IAP2 Anticuerpo (Ac-71): sc-517317
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) c-IAP2 | sc-400762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) c-IAP2 | sc-400762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BIRC3 codifica la proteína inhibidora celular humana de la apoptosis 2 (c-IAP2), una ligasa E3 de ubiquitina que regula la señalización de la superfamilia del receptor de TNF mediante la ubiquitinación de RIPK1 y adaptadores relacionados, con el fin de modular la activación de NF-κB, las respuestas inflamatorias y las decisiones de muerte celular. A través de sus dominios BIR y su dominio RING, c-IAP2 integra el control dependiente de ubiquitina de la apoptosis y la necroptosis, configurando la actividad de las caspasas y las señales de supervivencia en respuesta a citocinas y al estrés. La disfunción o la expresión desregulada de BIRC3 se asocia con una señalización inmunitaria alterada y resistencia a la apoptosis, y se han descrito perturbaciones recurrentes de esta vía en neoplasias hematológicas y otros cánceres. Como nodo dentro de las redes ubiquitina–proteasoma y TNF/NF-κB, BIRC3 se investiga con frecuencia en estudios sobre señalización inflamatoria, puntos de control de supervivencia celular y reprogramación de vías mediada por ubiquitina.
c-IAP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BIRC3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BIRC3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BIRC3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BIRC3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.