c-Fos Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400009-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- c-FosO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase c-Fos (h) e o Plasmídeo Double Nickase c-Fos (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FOS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:c-Fos Anticorpo (D-1): sc-8047
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
c-Fos Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400009-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Fos Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400009-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **FOS** codifica o **c-Fos**, um fator de transcrição de resposta imediata (immediate-early) que se dimeriza com proteínas da família **JUN** para formar o **AP-1**, conectando rapidamente estímulos extracelulares a programas de expressão gênica. O c-Fos é induzido a jusante das vias de sinalização **MAPK/ERK**, **JNK**, **p38** e de sinalização dependente de cálcio, e regula redes transcricionais que controlam proliferação, diferenciação, respostas ao estresse, apoptose e motilidade celular. Por meio do controle dependente de AP-1 de citocinas, enzimas de remodelamento da matriz e reguladores do ciclo celular, o **FOS** integra sinais inflamatórios e mitogênicos em muitos tipos celulares. A atividade desregulada de **FOS/AP-1** é frequentemente usada como um marcador molecular de ativação de vias e tem sido associada à sinalização oncogênica, ativação imune aberrante e alterações de plasticidade neuronal em contextos relevantes para doenças.
c-Fos O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FOS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FOS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FOS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FOS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.