C/EBP δ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400772

Descripción general

CEBPD codifica el factor de transcripción C/EBPδ, una proteína de cremallera de leucina básica que regula programas de expresión génica vinculados a la señalización inmunitaria innata, las respuestas al estrés celular y la diferenciación. C/EBPδ se induce por señales inflamatorias y participa en redes transcripcionales aguas abajo de las vías de citocinas y de los receptores tipo Toll, modulando la expresión de mediadores implicados en funciones de fase aguda y asociadas al linaje mieloide. También se integra con el control del ciclo celular y las vías de supervivencia, contribuyendo a una regulación dependiente del contexto de la proliferación, la senescencia y la adaptación metabólica. Se ha descrito actividad desregulada de CEBPD en diversas afecciones inflamatorias y en múltiples contextos de cáncer, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para estudiar el control transcripcional en estados de señalización relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO C/EBP δ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CEBPD en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CEBPD junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CEBPD tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína C/EBP δ.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CEBPD para la investigación de la señalización de C/EBP δ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CEBPD críticos para la función de C/EBP δ
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CEBPD para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido C/EBP δ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido C/EBP δ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CEBPD. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR C/EBP δ (h) y el plásmido HDR C/EBP δ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CEBPD para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CEBPD definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.