BTG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407253
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BTG3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BTG3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BTG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407253 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BTG3 (gen de translocación de células B 3) codifica una proteína antiproliferativa de la familia BTG/TOB que ayuda a coordinar el control del ciclo celular y la diferenciación celular. BTG3 funciona como corregulador transcripcional e interactúa con vías que gobiernan la transición G1/S, las respuestas al daño del ADN y la señalización apoptótica, vinculando su actividad con el mantenimiento de la estabilidad genómica. Se ha informado de una expresión alterada de BTG3 en múltiples contextos tumorales y, por lo general, se asocia con proliferación desregulada, señalización de respuesta al estrés y cambios en el estado de diferenciación, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos del control del crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BTG3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BTG3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BTG3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BTG3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BTG3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BTG3 para la investigación de la señalización de BTG3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BTG3 críticos para la función de BTG3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BTG3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BTG3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BTG3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BTG3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BTG3 (h) y el plásmido HDR BTG3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BTG3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BTG3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.