Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BTEB1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402170-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BTEB1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BTEB1 Double-Nickase-Plasmid (h) und BTEB1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf KLF9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: BTEB1: sc-376422
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BTEB1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402170-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BTEB1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402170-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLF9 (auch bekannt als BTEB1) kodiert einen Krüppel-ähnlichen Zinkfinger-Transkriptionsfaktor, der an GC-reiche Promotorelemente bindet, um kontextabhängige Genexpressionsprogramme zu regulieren, die Differenzierung, Zellzyklusprogression und zelluläre Stressantworten steuern. BTEB1 integriert Signale aus nukleären Rezeptor- und MAPK-assoziierten Signalwegen, um Transkriptionsausgänge zu modulieren, die Stoffwechsel, Entwicklung und Gewebeumbau prägen. Eine veränderte KLF9-Expression wurde mit einer dysregulierten Bewältigung oxidativen Stresses und aberranten Transkriptionsnetzwerken in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten in Verbindung gebracht, darunter endokrine und neurologische Phänotypen sowie die Tumorbiologie. Als Transkriptionsregulator mit breiter Promotorbesetzung wird KLF9 häufig hinsichtlich der Architektur seiner nachgeschalteten Zielgene und seiner Rolle bei der Ausprägung linienspezifischer Transkriptionszustände untersucht.
BTEB1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des KLF9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von KLF9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die KLF9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit KLF9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.