Plasmide Double Nickase (h) BTC: sc-401927-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BTC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BTC Double Nickase (h) et le plasmide BTC Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BTC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BTC Antibody (E-12): sc-514061
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BTC | sc-401927-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BTC | sc-401927-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La bétacelluline (BTC) est un ligand sécrété de la famille des récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR) qui se lie à EGFR et à ERBB4 afin de stimuler la signalisation des récepteurs tyrosine kinases. L’activation, induite par BTC, des voies MAPK/ERK et PI3K–AKT régule la prolifération, la survie et la différenciation des cellules épithéliales, avec des rôles supplémentaires dans la réparation tissulaire et les programmes du développement. Dans les contextes pancréatique et gastro-intestinal, BTC contribue à une communication paracrine influençant l’homéostasie endocrine et épithéliale. Une dérégulation de la signalisation BTC–ERBB a été impliquée dans des altérations du contrôle de la croissance et dans la signalisation du microenvironnement inflammatoire, faisant de BTC un nœud pertinent pour des études mécanistiques de la biologie de la voie EGFR dans des modèles de maladie.
BTC Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BTC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BTC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BTC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BTC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.