Plásmido Doble Nickase (h) BPTF: sc-404092-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BPTF consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BPTF (h) y el plásmido de doble nickasa BPTF (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BPTF. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BPTF Anticuerpo (2343C3a): sc-81088
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BPTF | sc-404092-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BPTF | sc-404092-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BPTF (factor de transcripción con dedo PHD y bromodominio) es una subunidad central del complejo de remodelación de cromatina NURF, que acopla el reconocimiento de modificaciones de histonas con el deslizamiento de nucleosomas dependiente de ATP, configurando así la accesibilidad de la cromatina y los programas transcripcionales. A través de su dedo PHD y su bromodominio, BPTF integra señales de la metilación de H3K4 y la acetilación de histonas para regular redes de expresión génica que controlan el desarrollo, la especificación de linaje y la progresión del ciclo celular. La remodelación dependiente de BPTF influye en la actividad de los potenciadores y en la ocupación de factores de transcripción, vinculando el estado epigenético con la transcripción mediada por la ARN polimerasa II. La expresión o la función desreguladas de BPTF se han asociado con estados de cromatina alterados y dependencias transcripcionales observadas en múltiples contextos relacionados con el cáncer y el neurodesarrollo, lo que respalda su uso como diana de investigación en epigenética y biología de la transcripción.
BPTF El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BPTF en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BPTF. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BPTF. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BPTF alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.