BPAG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403388-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BPAG1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BPAG1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BPAG1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DST. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BPAG1 Anticorpo (1B10): sc-293499
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BPAG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403388-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BPAG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403388-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dystonin (DST), também conhecido como BPAG1, codifica uma grande proteína ligadora do citoesqueleto da família das plaquinas, que conecta os filamentos intermédios à actina, aos microtúbulos e a complexos juncionais associados à membrana. Em contextos epiteliais e neuronais, o BPAG1 sustenta a integridade dos hemidesmossomas, a adesão célula–matriz e a organização do citoesqueleto, influenciando assim a polaridade celular, a migração e a resistência ao stress mecânico. As isoformas de DST participam em processos coordenados de ligação cruzada do citoesqueleto e de tráfego intracelular que afetam a arquitetura dos tecidos e a estabilidade axonal. A disrupção genética ou a alteração da expressão de DST tem sido associada a fenótipos cutâneos com formação de bolhas e a características neurodegenerativas, tornando-o um alvo relevante para estudar mecanismos de falha do citoesqueleto e a biologia das junções celulares.
BPAG1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DST em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DST. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DST. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DST interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.