BMPR-IA Double Nickase Plasmid (m): sc-419350-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BMPR-IA Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BMPR-IA Double-Nickase-Plasmid (m) und BMPR-IA Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Bmpr1a abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BMPR-IA Double Nickase Plasmid (m) | sc-419350-NIC | 20 µg | $410.00 |
Bmpr1a kodiert BMPR-IA (ALK3), einen Typ‑I‑Serin/Threonin‑Kinase‑Rezeptor für bone morphogenetic proteins (BMPs), der Signale über SMAD1/5/9 weiterleitet, um Transkriptionsprogramme zu regulieren, die die embryonale Musterbildung, die osteogene und chondrogene Differenzierung sowie die Gewebehomöostase steuern. Nach ligandenabhängiger Komplexbildung mit Typ‑II‑BMP‑Rezeptoren treibt BMPR‑IA die kanonische Signalübertragung des BMP/TGF‑β‑Signalwegs an und vermittelt zugleich eine kontextabhängige Wechselwirkung mit MAPK‑Kaskaden, die Proliferation, Apoptose und Linienfestlegung beeinflussen. Bei Mäusen führt eine veränderte Bmpr1a‑Aktivität zu Störungen der Entwicklungs‑Morphogenese und des Skelett‑Remodelings und wird genutzt, um Signalweg‑Dysfunktionen zu modellieren, die für angeborene Fehlbildungen, fibroseassoziiertes Remodeling und die Knochenbiologie relevant sind. Diese Eigenschaften machen BMPR‑IA zu einem zentralen Knotenpunkt, um BMP‑abhängige Zellschicksalsentscheidungen in Entwicklung und krankheitsrelevanten zellulären Phänotypen zu untersuchen.
BMPR-IA Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Bmpr1a-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Bmpr1a abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Bmpr1a-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Bmpr1a-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.